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          豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒實驗使用說明書

          發布者:陳媌媌 | 來源:本生(天津)健康科技有限公司發布時間:2025-05-30
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            豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒實驗使用說明書

            BS-4707 豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒

            以下是豬高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

            一、實驗原理

            采用雙抗體一步夾心法酶聯吸附試驗(ELISA)。預先包被HDL捕獲抗體的微孔板中依次加入標本、標準品和HRP標記檢測抗體,經溫育洗滌后,通過TMB顯色反應(藍色→黃色)測定450nm吸光度,顏色深淺與HDL濃度呈正相關。

            二、樣本處理要求

            血清?:采集后1000×g離心10分鐘分離,避免溶血或脂血;

            血漿?:EDTA/肝素抗凝,1000×g離心30分鐘去除顆粒;

            組織勻漿?:需充分勻漿后離心取上清;

            保存?:2-8℃可存7天,長期需分裝于-20℃以下,避免反復凍融。

            三、試劑盒組成

            預包被微孔板

            HDL標準品(不同濃度)

            HRP標記檢測抗體

            TMB顯色底物、終止液

            洗滌緩沖液(20×濃縮需稀釋)

            四、操作步驟

            加樣?:

            標準品孔:梯度濃度各50μL;

            樣本孔:樣本40μL+稀釋液10μL(5倍稀釋);

            孵育?:37℃避光溫育60分鐘,封板膜密封;

            洗滌?:棄液后加洗滌液靜置30秒,重復5次,拍干;

            顯色?:每孔加TMB底物50μL,37℃避光顯色15分鐘;

            終止?:加終止液50μL,15分鐘內測定450nm OD值。

            五、注意事項

            試劑保存?:未使用板條需密封防潮,2-8℃保存;

            操作規范?:

            不同批號試劑勿混用;

            移液誤差需<2%,避免產生氣泡;

            顯色后顏色異常(如深藍色)需棄用;

            質量控制?:

            批內CV<10%,批間CV<12%;

            每批次實驗需同步標準曲線。

            六、結果計算

            以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,通過樣本OD值計算濃度。

            注:本試劑盒科研使用,不可用于臨床診斷,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師。

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