豬白介素5(IL-5)ELISA試劑盒

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　　BS-4677   豬白介素5(IL-5)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法(Sandwich ELISA)檢測豬血清/血漿/組織勻漿中的IL-5濃度：

　　預包被抗豬IL-5抗體的微孔板捕獲樣本中的目標蛋白

　　依次加入生物素化檢測抗體、HRP標記鏈霉親和素(SABC)形成復合物

　　TMB顯色后，顏色深淺與IL-5濃度成正比(450nm測OD值)

　　二、試劑盒組分

　　組分? ?48T規格? ?96T規格? ?保存條件?

　　預包被酶標板 8×6條 8×12條 4℃

　　標準品(凍干粉) 1支 1支 -20℃

　　TMB顯色液(A/B) 各3mL 各6mL 避光4℃

　　20×濃縮洗滌液 30mL 60mL 室溫

　　注：不同品牌可能含生物素化抗體稀釋液、封板膠紙等附加組件

　　三、樣本處理要求

　　血清/血漿?：

　　使用EDTA/肝素抗凝管采集，1000×g離心10分鐘(血清)或30分鐘(血漿)

　　避免溶血或脂血樣本，2-8℃保存≤48小時，長期需-20℃/-80℃凍存

　　組織勻漿?：

　　按1:9比例加入PBS勻漿，10000×g離心10分鐘取上清

　　四、操作步驟(以96孔板為例)

　　標準品復溶?：用標準品稀釋液梯度稀釋(建議濃度范圍15.6-1000pg/mL)

　　加樣?：

　　每孔加100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘

　　洗滌?：

　　棄液后每孔加300μL 1×洗滌液(20×濃縮液稀釋)，重復5次

　　顯色?：

　　加TMB底物50μL/孔，避光反應15-30分鐘

　　終止與檢測?：

　　加50μL終止液，立即在450nm讀板

　　五、注意事項

　　安全防護?：避免接觸TMB底物(致癌性)，操作時穿戴手套

　　質量控制?：

　　標準曲線R2應≥0.99

　　復孔CV值建議<15%

　　有效期?：未開封試劑盒2-8℃保存6個月，開封后板條需密封防潮

　　六、適用機型

　　適配主流酶標儀(如BioTek Synergy H1、Thermo Multiskan FC等)

　　注：以上資料僅供參考，如需完整說明書，建議聯系供應商獲取新版本。

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