人低密度脂蛋白受體相關蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒

　　以下是關于人低密度脂蛋白受體相關蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒的標準化操作說明：

　　BS-0572-HA 人低密度脂蛋白受體相關蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒

　　一、檢測原理

　　采用雙抗體夾心ELISA法，將抗LRP1B抗體預包被于酶標板，通過抗原-抗體-HRP酶復合物與TMB底物顯色反應進行定量檢測。

　　二、試劑盒組成

　　典型配置包含(不同廠商可能差異)：

　　預包被96孔板(可拆卸)

　　LRP1B標準品(凍干粉，含稀釋液)

　　HRP標記檢測抗體

　　20×濃縮洗滌液

　　TMB顯色底物(A/B液需等體積混合)

　　終止液(2M硫酸)

　　三、樣本處理要求

　　適用樣本?：

　　血清：3000rpm離心10分鐘分離

　　血漿：需EDTA/肝素抗凝

　　細胞上清液：去除沉淀后檢測

　　保存條件?：

　　短期(1周內)：2-8℃

　　長期：-20℃分裝，避免反復凍融

　　四、標準曲線制備

　　標準品通常需梯度稀釋至以下濃度范圍：

　　基礎濃度：10,000pg/mL原液

　　工作濃度：78-5,000pg/mL(7個梯度+空白)

　　五、操作流程

　　加樣?：

　　每孔加入100μL標準品/樣本

　　37℃孵育90分鐘

　　洗滌?：

　　手工洗板：注滿洗滌液靜置1分鐘，重復5次

　　酶標抗體?：

　　加HRP標記抗體100μL，37℃孵育60分鐘

　　顯色?：

　　加TMB底物避光反應15-30分鐘

　　終止與檢測?：

　　加終止液后立即用450nm酶標儀讀數

　　六、結果計算

　　以標準品OD值繪制四參數對數曲線

　　樣本濃度需乘以稀釋倍數

　　七、注意事項

　　質量控制?：

　　建議CV值控制：批內<10%，批間<12%

　　每板需設復孔和空白對照

　　干擾規避?：

　　溶血/脂血樣本需預處理

　　避免金屬離子污染顯色系統

　　儲存條件?：

　　未開封試劑盒：2-8℃保存

　　開封后酶標板需密封防潮

　　(注：具體參數請以實際試劑盒說明書為準，不同品牌可能存在差異，以上資料僅供參考，具體請咨詢技術老師或供應商)。

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