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天津本生 |
人低密度脂蛋白受體相關蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒說明書
BS-0572-HA 人低密度脂蛋白受體相關蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒
以下是關于天津本生人低密度脂蛋白受體相關蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒的標準化操作說明:
一、檢測原理
采用雙抗體夾心ELISA法,將抗LRP1B抗體預包被于酶標板,通過抗原-抗體-HRP酶復合物與TMB底物顯色反應進行定量檢測。
二、試劑盒組成
典型配置包含(不同廠商可能差異):
預包被96孔板(可拆卸)
LRP1B標準品(凍干粉,含稀釋液)
HRP標記檢測抗體
20×濃縮洗滌液
TMB顯色底物(A/B液需等體積混合)
終止液(2M硫酸)
三、樣本處理要求
適用樣本?:
血清:3000rpm離心10分鐘分離
血漿:需EDTA/肝素抗凝
細胞上清液:去除沉淀后檢測
保存條件?:
短期(1周內):2-8℃
長期:-20℃分裝,避免反復凍融
四、標準曲線制備
標準品通常需梯度稀釋至以下濃度范圍:
基礎濃度:10,000pg/mL原液
工作濃度:78-5,000pg/mL(7個梯度+空白)
五、操作流程
加樣?:
每孔加入100μL標準品/樣本
37℃孵育90分鐘
洗滌?:
手工洗板:注滿洗滌液靜置1分鐘,重復5次
酶標抗體?:
加HRP標記抗體100μL,37℃孵育60分鐘
顯色?:
加TMB底物避光反應15-30分鐘
終止與檢測?:
加終止液后立即用450nm酶標儀讀數
六、結果計算
以標準品OD值繪制四參數對數曲線
樣本濃度需乘以稀釋倍數
七、注意事項
質量控制?:
建議CV值控制:批內<10%,批間<12%
每板需設復孔和空白對照
干擾規避?:
溶血/脂血樣本需預處理
避免金屬離子污染顯色系統
儲存條件?:
未開封試劑盒:2-8℃保存
開封后酶標板需密封防潮
(注:具體參數請以實際試劑盒說明書為準,不同品牌可能存在差異,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或供應商)。
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