人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒

　　人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

　　BS-0572-HA  人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒

　　以下是關(guān)于天津本生人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)化操作說(shuō)明：

　　一、檢測(cè)原理

　　采用雙抗體夾心ELISA法，將抗LRP1B抗體預(yù)包被于酶標(biāo)板，通過(guò)抗原-抗體-HRP酶復(fù)合物與TMB底物顯色反應(yīng)進(jìn)行定量檢測(cè)。

　　二、試劑盒組成

　　典型配置包含(不同廠商可能差異)：

　　預(yù)包被96孔板(可拆卸)

　　LRP1B標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉，含稀釋液)

　　HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體

　　20×濃縮洗滌液

　　TMB顯色底物(A/B液需等體積混合)

　　終止液(2M硫酸)

　　三、樣本處理要求

　　適用樣本?：

　　血清：3000rpm離心10分鐘分離

　　血漿：需EDTA/肝素抗凝

　　細(xì)胞上清液：去除沉淀后檢測(cè)

　　保存條件?：

　　短期(1周內(nèi))：2-8℃

　　長(zhǎng)期：-20℃分裝，避免反復(fù)凍融

　　四、標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

　　標(biāo)準(zhǔn)品通常需梯度稀釋至以下濃度范圍：

　　基礎(chǔ)濃度：10,000pg/mL原液

　　工作濃度：78-5,000pg/mL(7個(gè)梯度+空白)

　　五、操作流程

　　加樣?：

　　每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本

　　37℃孵育90分鐘

　　洗滌?：

　　手工洗板：注滿洗滌液靜置1分鐘，重復(fù)5次

　　酶標(biāo)抗體?：

　　加HRP標(biāo)記抗體100μL，37℃孵育60分鐘

　　顯色?：

　　加TMB底物避光反應(yīng)15-30分鐘

　　終止與檢測(cè)?：

　　加終止液后立即用450nm酶標(biāo)儀讀數(shù)

　　六、結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品OD值繪制四參數(shù)對(duì)數(shù)曲線

　　樣本濃度需乘以稀釋倍數(shù)

　　七、注意事項(xiàng)

　　質(zhì)量控制?：

　　建議CV值控制：批內(nèi)<10%，批間<12%

　　每板需設(shè)復(fù)孔和空白對(duì)照

　　干擾規(guī)避?：

　　溶血/脂血樣本需預(yù)處理

　　避免金屬離子污染顯色系統(tǒng)

　　儲(chǔ)存條件?：

　　未開(kāi)封試劑盒：2-8℃保存

　　開(kāi)封后酶標(biāo)板需密封防潮

　　(注：具體參數(shù)請(qǐng)以實(shí)際試劑盒說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，不同品牌可能存在差異，以上資料僅供參考，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或供應(yīng)商)。

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